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内容计划&大纲




所见即所得
Linux基础课学习手册


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Python基础课学习手册




空间转录组-概论及上游定量学习资料


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教程目录:
零、欢迎关注
一、空间转录组概论&常见平台的上游定量
1.1 背景与发展历程
1.2 技术分类
1.3 实验流程
1.3.1 10x Visium
1.3.2 SeekSpace(高通量条码捕获+空间分辨率优化)
1.3.3 Stereo-seq
(1)Stereo-seq的DNA Nanoball(DNB)技术
1.4 空间转录组平台对比
二、上游测序数据定量
2.1 10x Visium平台
2.1.1 软件安装
2.1.2 示例数据下载
2.1.3 参考基因组构建(适用于非模式动物)
2.1.4 定量
2.1.5 结果文件概况
2.1.6 Space Ranger Metrics说明
2.2 SeekSpace平台
2.3 Stereo-seq平台

空间转录组-基础分析学习资料


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教程目录:
零、欢迎关注
一、添加空间坐标和图像信息(早期版本)
二、添加QC指标(线粒体基因+核糖体基因)
三、动态过滤(Adaptive Filtering)
四、归一化
五、选择高度可变的基因
六、t-SNE
七、寻找差异marker基因
八、空间转录组的图像数据
九、空间统计和图表统计

空间转录组-进阶分析-多样本分析学习资料


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零、欢迎关注
一、数据整合
1.1 数据整合模型的比较
1.2 导入数据
1.3 过滤初始数据(不推荐)
1.4 基础处理,均一化(normalize)
1.5 聚类
1.6 harmony去批次
1.7 重新聚类
1.8 Scanorama
1.9 Combat矫正
1.10 BBKNN矫正
二、深度学习模型
2.1 基于变分自编码器的模型
2.2 GraphST

空间转录组-进阶分析-共表达网络分析学习资料


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零、欢迎关注
一、SCENIC分析空间转录组转录因子
1.1 基因调控网络推断,生成共表达模块
1.1.1 使用GRNBoost2算法推断基因调控网络(GRN)
1.2 Cistarget预测
1.3 转录因子的细胞富集
二、可视化AUC矩阵
2.1 数据输入
2.2 提取相关数据整合
2.3 差异regulons
2.4 结合空间样本的TF活性可视化
2.5 TF活性热图

空间转录组-进阶分析-去卷积分析学习资料


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零、欢迎关注
一、Cell2location
1.1 Cell2location映射到空间转录组
1.1.1 加载安装的库
1.1.2 价值单细胞转录组参考数据
1.1.3 参考细胞类型特征估计(Estimation of reference cell type signatures)------NB回归)
1.1.4 检查QC质量图表
1.2 数据和模型读取
1.2.1 Cell2location:空间映射
1.2.2 可视化细胞类型丰度
1.2.3 下游分析
(1)通过聚类来区分不同组织区域
1.2.4 非负矩阵分解(NMF)识别细胞区室/组织区域
(1)输出结果说明
1.2.5 估计空间数据中每个基因的细胞类型特异性表达
二、Tangram
2.1 加载空间转录组和单细胞参考数据
2.2 预处理
2.3 数据对齐
2.4 细胞类型映射
2.5 通过对齐单细胞数据获得新的空间数据
2.6 通过比对单细胞数据进行反卷积

空间转录组-进阶分析-邻域分析学习资料


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一、stLearn的SME (Spatial Morphology Expression) 归一化算法
1.1 背景
1.2 方法原理(SME = Spatial Morphology Expression)
1.2.1 提取形态学特征
1.2.2 计算形态学特征
1.2.3 基因表达调整(Morphological normalization)
1.2.4 形态调整后的基因表达矩阵(Morph)
1.3 特点与优势
1.4 例1:小鼠大脑(冠状面)
1.4.1 数据预处理
1.4.2 运行stSME聚类
1.5 例2:小鼠大脑(后矢状面)
二、基于空间转录组的图像数据的邻域分析
2.1 加载所需库
2.2 读取数据
2.3 计算不同尺度的特征
2.4 数据聚合
2.5 数据基础分析
2.6 可视化聚类信息
2.7 空间统计和图表分析
2.7.1 邻域富集
2.8 配体-受体相互作用分析

空间转录组-进阶分析-细胞通讯分析学习资料


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一、CellphoneDB
1.1 检查版本信息
1.2 安装CellphoneDB
1.3 输入文件
1.4 检查输入文件
1.5 运行统计分析
1.6 输出文件信息
1.7 解释CellphoneDB结果
1.8 基础结果可视化
1.9 按递归排序
二、commot
2.1 安装
2.2 测试文件
2.2.1 导入所需库和包
2.2.2 预处理空间数据文件
2.2.3 空间通讯信号推断
三、stlearn
3.1 StLearn细胞间相互作用分析
3.1.1 环境配置
3.1.2 数据加载和预处理
3.1.3 运行受配体分析
3.1.4 P值矫正
3.1.5 按显著程度可视化LR的整体排名
3.1.6 判定绘图
3.1.7 下游可视化
(1)受配体对的统计可视化
(2)LR解释结果可视化
(3)预测重要的CCIs
(4)检查相互作用和细胞类型频率相关性
(5)CCI可视化
(6)空间细胞类型的相互作用
3.2 作者建议-可视化技巧

空间转录组-进阶分析-轨迹分析学习资料


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一、stLearn_pse
1.1数据准备
1.1.1 读取和预处理数据
1.1.2 聚类
1.2 空间轨迹推理
1.2.1 选择分化起点(根节点)
1.2.2 空间轨迹推断--全体水平
1.2.3 检测过渡标志
二、SIRV
2.1 准备工作
2.2 SIRV实现流程
2.2.1 输入数据
2.2.2 域适配(Domain Adaptation / Alignment)
2.2.3 基于scRNA-seq训练模型 / 回归
2.2.4 将预测的velocity映射到空间
2.2.5 标签转移
2.3 运行示例
2.3.1 加载所需的库
2.3.2 读取示例数据
2.3.3 补全信息
2.3.4 常规降维
2.3.5 降维聚类
2.3.6 velocity推断流程
2.3.7 可视化流线图
2.3.8 局部流向箭头图
2.3.9 比较补全前后信息
2.3.10 评估velocity相似性

空间转录组-进阶分析-拷贝数变异分析学习资料


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零、欢迎关注
一、使用模拟数据运行CalicoST
1.1 下载数据
1.2 运行CalicoST
二、复制configuration文件来用于推断CNA和癌症克隆
2.1 加载结果到python中进行可视化


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