1. UHMK1 通过调控 KHK 可变剪接，重塑肝癌细胞代谢与增殖表型
果糖激酶（KHK）是果糖代谢的关键酶，存在 KHK-A 和 KHK-C 两种可变剪接亚型 —— 其中 KHK-A 可活化磷酸戊糖途径、增强细胞抗氧化能力，是驱动肝癌恶性代谢的核心亚型。
团队通过全基因组外显子芯片分析发现：沉默 UHMK1 可影响 195 个基因的 RNA 可变剪接模式，其中 KHK 的剪接变化最为显著 ——UHMK1 缺失会导致 KHK-A 表达下调、KHK-C 表达上调，且这一趋势在 Hep3B、HuH7 等多株肝癌细胞系中均得到验证（相较于非恶性肝细胞株 HHT4，肝癌细胞中普遍存在 UHMK1 与 KHK-A 高表达、KHK-C 低表达的关联特征）。
功能实验进一步证实：沉默 UHMK1 或 KHK-A 均会导致肝癌细胞内 NADPH/NADP⁺比率下降（磷酸戊糖途径活性减弱）、活性氧（ROS）清除能力降低，进而抑制细胞增殖；而 “沉默 UHMK1 + 过表达 KHK-A” 的挽救实验可完全逆转上述代谢与增殖缺陷。动物模型（液态高压注射 c-MYC 诱导小鼠原位肝癌）结果显示：沉默 UHMK1 能显著阻断肝癌发生，而恢复 KHK-A 表达可重新驱动肿瘤生长，证实 “UHMK1-KHK 可变剪接” 轴是肝癌体内进展的关键调控通路。
2. UHMK1 通过与剪接因子 hnRNPH1 相互作用，间接调控 KHK 可变剪接
为明确 UHMK1 调控 KHK 剪接的分子媒介，团队通过 RIP 实验发现：UHMK1 并不直接结合 KHK RNA，提示其可能通过剪接复合体间接发挥作用。利用邻近生物素标记（BioID）与蛋白质谱分析，团队从 295 个 UHMK1 互作蛋白中鉴定出 27 个剪接因子，其中 hnRNPH1（异质核糖核蛋白 H1）与 UHMK1 的相互作用经免疫共沉淀（Co-IP）实验证实。
功能验证显示：沉默 hnRNPH1 可模拟 UHMK1 缺失的效应 —— 显著下调 KHK-A 表达、上调 KHK-C 表达，同时导致肝癌细胞增殖抑制、NADPH 生成减少、抗氧化能力减弱；且 RIP 实验证实 hnRNPH1 可直接结合 KHK RNA。上述结果表明，hnRNPH1 是 UHMK1 调控 KHK 可变剪接的关键下游剪接因子。
3. UHMK1 通过激酶结构域介导 hnRNPH1 S310 位点磷酸化，激活其剪接功能
为解析 UHMK1 调控 hnRNPH1 的分子细节，团队构建了激酶结构域失活突变体（UHMK1^K54R）。实验发现：相较于野生型 UHMK1（UHMK1^WT），UHMK1^K54R 完全丧失了与 hnRNPH1 的结合能力，且无法促进 KHK-A 表达；Phos-tag 检测（特异性捕获磷酸化蛋白）进一步证实，UHMK1 可通过激酶活性促进 hnRNPH1 磷酸化。
通过分段克隆与点突变实验，团队明确：hnRNPH1 的 C 端（251-499 位氨基酸）是其与 UHMK1 结合的关键区域，且 UHMK1 介导的磷酸化位点为 hnRNPH1 的 S310 位点（将 S310 突变为丙氨酸 “S310A” 后，hnRNPH1 与 UHMK1 的结合完全消失，且无法调控 KHK 剪接）。
动物模型验证显示：在沉默内源性 hnRNPH1 的小鼠中，过表达野生型 hnRNPH1 可重新驱动肝癌发生，而过表达 S310A 突变型 hnRNPH1 则完全丧失促癌能力，证实 hnRNPH1 S310 磷酸化是肝癌进展的 “不可缺少环节”。
